RESUMEN

Antecedentes: la ATPasa-Na⁺-K⁺ es un marcador útil para precisar el origen de las células de tejidos de la mama con cáncer.

Objetivo: demostrar, mediante detección histoquímica, la actividad de la ATPasa-Na⁺-K⁺ y la viabilidad de las vesículas de la membrana plasmática aisladas de tejidos con carcinoma mamario.

Pacientes y método: se procesó tejido tumoral mamario de algunas de las pacientes que asistieron a consulta al servicio de oncología mamaria del Hospital de Ginecoobstetricia núm. 4 Dr. Luis Castelazo Ayala, IMSS. Parte del tejido del adenocarcinoma se homogeneizó en cuatro volúmenes de solución TED a 4°C (Tris-HCl 0.01 M, EDTA 0.0015 M y ditiotreitol 0.001 M, pH 7.4) y luego se centrifugó. El precipitado obtenido se homogenizó y estratificó en un gradiente discontinuo de sacarosa (del 20 al 55%), y luego se centrifugó durante 60 minutos a 30,000 xg. Con el fin de demostrar la actividad de la ATPasa-Na⁺-K⁺ en las vesículas de la membrana plasmática, la suspensión obtenida se incubó en un medio con Tris-maleato 0.04 M, adenosintrifosfato (ATP) 0.004 M, Mgcl 20.004 M, NaCl 0.1 M y Pb (NO₃) 20.005 M, pH 7.0. La reacción se realizó a 37°C durante 15 minutos, en vesículas prefijadas y no fijadas en una mezcla de glutaraldehído al 3% con amortiguador de cacodilatos 0.1 M, pH7.4, durante 60 min.

Resultados: el estudio de histoquímica demostró que las vesículas que se obtuvieron de tejidos de mama con cáncer son de origen membranal y que siguen siendo viables después de la progresión tumoral.

Palabras clave: ATPasa-Na⁺-K⁺, membrana plasmática, progresión tumoral.

ABSTRACT

Background: -Na⁺-K⁺ ATPase is a useful marker which determines the origin of breast cancer cells.

Objective: -Na⁺-K⁺ ATPase activity, as well as viability of plasma membrane vesicles isolated from breast carcinoma tissues were demonstrated by histochemical detection.

Patients and method: Breast carcinoma tissue samples of patients who attended consultation in the oncology service at Hospital de Ginecoobstetricia Núm. 4 Dr. Luis Castelazo Ayala, IMSS were examined. Tissue samples from adenocarcinoma were homogenized in 4 volumes of TED solution at 4°C (Tris-HCl 0.01 M, EDTA 0.0015 M, ditiotreitol 0.001 M, pH 7.4) and subsequently centrifuged. The collected sample was homogenized and stratified in a discontinuous sucrose gradient (20 to 50%) and then centrifuged for 60 min at 30,000 xg. In order to determine -Na⁺-K⁺ ATPase activity in plasma membrane vesicles, suspension was incubated at Tris-maleate 0.04 M, adenosine triphosphate (ATP) 0.004 M, Mgcl 20.004 M, NaCl 0.1 M y Pb (NO3) 20.005 M, pH 7.0. Reactions were carried out for 15 min at 37°C in prefixed vesicles in 3% glutaraldehyde in 0.1 M, cacodylate buffer stock, pH7.4 for 60 min.

Results: Histochemical detection demonstrated membrane vesicles from breast carcinoma tissues and proved their viability after tumoral progression.

Key words: -Na⁺-K⁺ ATPase, plasma membrane, tumoral progression.