ABSTRACT
Background: The rise of cholagenolitic activity in fetal membranes, associated to premature rupture, have been related to abnormal activity of the extracellular matrix metalloproteinases discharged to the extracellular space as inactive enzymes that have to be activated to selectively degrade its components.
Objective: To analyze the functional properties of leukocytes subpopulations coming from the placental circulation.
Material and methods: Biomedical experimental study in which placental and outlying blood leukocytes were cultivated during 96 hours, from women with pregnancy to term without labor. Leukocytes subpopulations were stained by flow cytometry. Culture media were analyzed with zymography and enzymatic activity profile was evaluated in presence of proteases inhibitors.
Results: Placental leukocytes are composed of T-, NK- and B-lymphocytes, and monocytes; it was documented a progressive increase of inactive MMP-9 secretion (92 kDa), accompanied by an 82 kDa form MMP-9 activation since 48 hours. Enzymatic profile mainly showed metalloproteasas.
Conclusions: Placental blood leukocytes showed functional capacities different from those that circulate in pregnant women’s outlying circulation. Placental leukocytes, mainly T-lymphocytes, are characterized by the specific capacity to secrete and activate MMP-9; an enzyme that participates in fetal membranes degradation. It suggests that in placental surroundings are recruited cells specialized in labor changes induction.
Key words: placenta, leukocytes, MMP-9.
RÉSUMÉ
Antécédents : l’augmentation de l’activité collagène-lytique dans les membranes fœtales, attachée à rupture prématurée, a été liée avec l’activité anormale des métalloprotéases de matrice extracellulaire sécrétées à l’espace extracellulaire sous forme d’enzymes inactives et qui doivent être activées pour dégrader sélectivement leurs composantes.
Objectif : faire l’analyse des propriétés fonctionnelles des sous-populations de leucocytes provenant de la circulation du placenta.
Matériel et méthodes : étude biomédicale expérimentale dans laquelle on a cultivé des leucocytes de la circulation du placenta et du sang périphérique pendant 96 heures, de femmes avec grossesse à terme sans travail. Les sous-populations de leucocytes ont été identifiées par cytométrie en flux. Les milieux de culture ont été analysés avec zymographie et le profil d’activité enzymatique des milieux a été évalué en présence d’inhibiteurs de protéases.
Résultats : les leucocytes du placenta sont composés de lymphocytes T, NK, B et monolithes, on a prouvé augmentation progressive de la sécrétion de MMP-9 inactive (92 kDa) et activation de la MMP-9 à une forme de 82 kDa depuis les 48 heures. Le profil enzymatique a montré prédominance de métalloprotéases.
Conclusions : les leucocytes qui se trouvent dans le sang du placenta ont montré des capacités fonctionnelles différentes à ceux de la circulation périphérique des gestantes. Les leucocytes péri placentaires, presque tous lymphocytes T, sont caractérisés par capacité spécifique pour sécréter et activer MMP-9, enzyme qui participe de la dégradation des membranes fœtales. Ceci suggère que dans l’entourage du placenta sont recrutés des cellules spécialisés dans l’induction des changements liés au travail.
Mots-clés : placenta, leucocytes, MMP-9.
RESUMO
Antecedentes: O aumento da atividade colagenolítica nas membranas fetais, vinculado com a quebra prematura, está relacionado com a atividade anormal dos metilprotease de matriz extracelular secretadas ao espaço extracelular em forma de enzimas inativas, que se devem ativar para degradar seletivamente seus componentes.
Objetivo: Analisar as propriedades funcionais das subpopulações de leucócitos provenientes da circulação da placenta.
Material e métodos: Estudo biomédico experimental em que foi cultivado leucócito da circulação da placenta e do sangue periférico durante 96 horas, de mulheres com gravidez em término sem trabalho de parto. As subpopulações de leucócitos foram imunotificadas por citometria de fluxo. Os meios de cultivo foram analisados com cimografia e o perfil de atividade enzimática dos meios foi avaliado com a presença de inibidores de proteases.
Resultados: Os leucócitos da placenta componem-se de linfócitos T, NK, B e monócitos, que se comprovou um aumento progressivo da secreção de MMP-9 inativa (92 kDa) e ativação da MMP-9 a uma forma de 82 kDa desde 48 horas. O perfil enzimático mostrou predomínio de metilprotease.
Conclusões: Os leucócitos que se encontram no sangue da placenta mostraram capacidades funcionais diferentes dos da circulação periférica das grávidas. Os leucócitos periplacentários, quase todos linfócitos T, se caracterizam por uma capacidade específica para secretar e ativar MMP-9, enzima que participa na degradação das membranas fetais. Isto sugere que o ambiente da placenta recluta células especializadas na indução de mudanças relacionadas com o trabalho de parto.
Palavras-chave: placenta, leucócitos, MMP-9.
