Nivel de evidencia: II-1

RESUMEN

Antecedentes: los procesos biomoleculares asociados con el envejecimiento y la muerte celular programada durante la espermatogénesis son bien conocidos, pero no su trascendencia biológica en el esperma eyaculado, porque se ignora el comportamiento de estos marcadores  apoptósicos en relación con la edad del hombre. 

Objetivo: evaluar el efecto del envejecimiento en la capacidad funcional  del espermatozoide y su relación con los procesos de muerte celular programada.

Material y método: estudio prospectivo, transversal y analítico efectuado con muestras seminales de 25 sujetos sanos de 20 a 70 años de edad, que se dividieron en dos grupos [(A: menores de 40 años) y (B: mayores de 40 años de edad)]. Se evaluaron los parámetros seminales OMS (1999) y los procesos de  transformación biomolecular de membrana y la expresión  por oligonucleosomas en la cascada terminal de apoptosis. Se cuantificaron por medio de citometría de flujo con láser de argón como fuente de lectura a 480 nm, discriminando los grados de celularidad negativa y positiva para cada uno de los indicadores. 

Resultados: el porcentaje de células vivas con traslocación de fosfatidil serina en la membrana (anexina-V+/PI+) fue significativamente superior en los hombres mayores de 40 años  (p <0.05). Estos hallazgos se enriquecen con una correlación positiva y significativa (r= 0.50, P< 0.008), entre el biomarcador temprano y la edad de los sujetos. Respecto a la fragmentación del ADN, a pesar de no encontrarse diferencias estadísticamente significativas, sí se observó una tendencia clara de aumento conforme mayores eran los sujetos (r=0.51). 

Conclusiones: el incremento en la edad del hombre se asocia con aumento en la expresión de marcadores de apoptosis, lo que se demuestra por la mayor expresión de la traslocación de fosfatidil serina a nivel membranal. Así, este estudio confirma que la edad del sujeto se asocia con un declive en algunos de los parámetros seminales. 

Palabras clave: espermatozoide, semen, apoptosis, anexina V, TUNEL, fragmentación del ADN.

ABSTRACT

Background: biomolecular processes associated with aging and programmed cell death during spermatogenesis are well known, but not its biological significance in ejaculated sperm, because it ignores the behavior of these apoptotic markers in relation to the age of man.

Objective: To evaluate the effect of aging on the functional capacity of sperm and their relationship to programmed cell death processes.

Material and methods: Prospective, cross-sectional and analytical performed with semen samples from 25 healthy subjects 20 to 70 years old, were divided into two groups [(A: under 40 years) and (B: over 40 years age)]. Semen parameters were evaluated WHO (1999) and transformation processes biomolecular membrane and the expression of oligonucleosomes in the terminal cascade of apoptosis. Were measured by flow cytometry with an argon laser as a source of reading at 480 nm, the degree of cellularity discriminate negative and positive for each of the indicators.

Results: The percentage of live cells with phosphatidylserine translocation in the membrane (annexin-V / PI) was significantly higher in men older than 40 years (p <0.05). These findings are enriched with a significant positive correlation (r = 0.50, P <0.008) between early biomarker and age of the subjects. With regard to DNA fragmentation, although no statistically significant differences were found, it is a clear trend of increase as older the subjects (r = 0.51).

Conclusions: The increasing age of the man is associated with increased expression of apoptosis, as demonstrated by the increased expression of phosphatidylserine translocation at the Membrane. Thus, this study confirms that the subject’s age is associated with a decline in some of the seminal parameters.

Key words: sperm, semen, apoptosis, annexin V, TUNEL, DNA fragmentation.

RÉSUMÉ

Antécédents: les processus biomoléculaires associés au vieillissement et à la mort cellulaire programmée pendant la spermatogenèse sont bien connus, mais pas leur transcendance biologique sur le sperme éjaculé, car on ignore le comportement de ces marqueurs apoptosiques en relation avec l’âge de l’homme.

Objectif: évaluer l’effet du vieillissement dans la capacité fonctionnelle du spermatozoïde et sa relation avec les processus de mort cellulaire programmée.

Matériel et méthode: étude prospective, transversale et analytique effectuée avec des échantillons séminaux de 25 hommes en bonne santé de 20 à 70 ans, qui ont été classés en deux groupes [(A: mineurs de 40 ans) et B: majeurs de 40 ans)]. On a évalué les paramètres séminaux OMS (1999) et les processus de transformation biomoléculaire de membrane et l’expression par oligonucléosomes dans la cascade terminale d’apoptose. On a quantifié au moyen de cytométrie en flux avec laser d’argon comme source de lecture à 480 nm, en discriminant les degrés de cellularité négative et positive pour chacun des indicateurs.

Résultats: le pourcentage de cellules vivantes avec translocation de phosphatidylsérine dans la membrane (anexine-V+/Pl+) a été significativement supérieur chez les hommes majeurs de 40 ans (p<0.05). Ces découvertes s’enrichissent avec une corrélation positive et significative (r= 0.50, P< 0.008), entre le biomarqueur précoce et l’âge des hommes. Quant à la fragmentation de l’ADN, malgré le fait de n’avoir pas trouvé de différences statistiquement significatives, on a observé une claire tendance d’augmentation selon la supériorité d’âge des hommes (r=0.51).

Conclusions: l’augmentation de l’âge de l’homme est associée avec une augmentation dans l’expression des marqueurs d’apoptose, ce qui se démontre avec la majeure expression de la translocation de phosphatidylsérine au niveau de la membrane. Ainsi, cette étude confirme que l’âge de l’homme est associé avec un déclin dans quelques paramètres séminaux.

Mots-clés: spermatozoïde, sperme, apoptose, anexine V, TUNEL, fragmentation de l’ADN.

RESUMO

Antecedentes: Os processos biomoleculares associados com o envelhecimento e a morte celular programada durante a espermatogêneses são bem conhecidos, mas não a sua transcendência biológica no esperma ejaculado, porque se ignora o comportamento dos marcadores apoptóticos na relação com a idade do homem.

Objetivo: Avaliar o efeito do envelhecimento com a capacidade funcional do espermatozóide e sua relação com os processos de morte celular programada.

Material e método: Estudo prospectivo, transversal e analítico efetuado com amostras seminais de 25 pessoas saudáveis de 20 a 70 anos de idade, que foram divididos em dois grupos: [(A: menores de 40 anos) e (B: maiores de 40 anos de idade)]. Foram avaliados os parâmetros seminais OMS (1999) e os processos de transformações biomoleculares de membrana e a expressão por oligonucleossomas na cascada terminal de apoptoses. Foram quantificados por meio de citometria de fluxo com laser de árgon como fonte de leitura a 480 nm, discriminando os graus de celularidade negativa e positiva para cada um dos indicadores. 

Resultados: A porcentagem de células vivas com inversão de fosfatidil serina na membrana (anexina-V+/PI+) foi significativamente superior nos homens com mais de 40 anos (p < 0,05). Esses achados foram enriquecidos com uma correlação positiva e significativa (r = 0,50, P< 0,008), entre o biomarcador precoce e a idade dos pesquisados. Com respeito a fragmentação do DNA, apesar de não encontrar diferenças estatisticamente significativas, foi observado uma tendência clara de aumento conforme mais velhos eram os pesquisados (r = 0,51).

Conclusões: O incremento da idade do homem é associado com o aumento da expressão de marcadores de apoptoses, o que se demonstra pela maior expressão da inversão de fosfatidil serina a nível de membrana. Assim, este estudo confirma que a idade do homem pesquisado se associa com um declive em alguns dos parâmetros seminais.

Palavras-chave: espermatozóide, sêmen, apoptoses, anexina V, TUNEL, fragmentação de DNA.