RESUMEN

Antecedentes: a partir del descubrimiento del ADN fetal libre (cffDNA) en sangre materna por Lo y colaboradores en 1997, se abrió la posibilidad de realizar una prueba prenatal no invasiva (NIPT). La utilidad clínica de esta prueba radica en el análisis de las tres aneuploidías más frecuentes y la identificación del sexo del feto. Mediante la secuenciación masiva paralela (MPS) se amplifica y detecta el origen de cada secuencia, lo que permite la exploración de la sobrerrepresentación o disminución de algún cromosoma fetal en el plasma materno. Esta técnica ha sido validada y facilita la detección de las trisomías 13, 18 y 21 a partir de la semana 10 de gestación. Se espera que con la aplicación de esta prueba se realicen menos estudios invasores y que disminuya el riesgo de pérdida fetal que conllevan.

Objetivo: comunicar la experiencia inicial de la Unidad de Genética del Hospital Ángeles Lomas en la aplicación de la prueba prenatal no invasiva a través de secuenciación masiva paralela como método de tamiz para aneuploidías y determinación del sexo fetal.

Método: estudio observacional, descriptivo y prospectivo de una base de datos de pacientes a quienes se realizó la prueba prenatal no invasiva (prueba Harmony^®) de agosto de 2013 a la enero de 2015 en la Unidad de Genética del Hospital Ángeles Lomas, lo encontrado se correlacionó con lo reportado en la bibliografía. Las muestras de sangre materna se analizaron en Ariosa Diagnostics San José, California, Estados Unidos.

Resultados: se efectuaron 42 pruebas. El promedio de edad materna fue de 37.1 años, la edad gestacional de 13.3 semanas y el porcentaje de la fracción de DNA fetal de 12.7%. Se encontraron dos casos con riesgo alto de trisomía 18 y dos para monosomía del cromosoma X. Sólo en un caso se aplicó la prueba para detectar el sexo del feto debido a que la madre padecía la enfermedad de Wiskott Aldrich (W-A), que está ligada al cromosoma X. En todos los casos de bajo riesgo el resultado se corroboró al momento del nacimiento, y el sexo fetal concordó con lo reportado en el estudio.

Conclusiones: en esta serie la indicación más frecuente fue la edad materna mayor a 35 años. El peso de las mujeres es importante porque se trata de un factor relacionado con el porcentaje de cffDNA. En los casos con alto riesgo de monosomía X, en los que el resultado citogenético fue 46,XX, se consideraron diversas causas, como disomía uniparental, mosaicismo y contaminación materna antes de confirmar un resultado falso positivo. En el caso en que se aplicó la prueba para conocer el sexo fetal por antecedente de enfermedad de Wiskott Aldrich, se confirmó en líquido amniótico. En los casos de resultados de alto riesgo antes de tomar una decisión obstétrica, es indispensable la confirmación con un método invasivo. Aún se requieren más estudios para validar esta prueba a través de diferentes técnicas moleculares y en diversos grupos de pacientes.

Palabras clave: prueba prenatal no invasiva, ADN libre fetal, tamiz prenatal.

ABSTRACT

Background: Discovery of cell-free fetal DNA (cffDNA) in maternal blood in 1997 by Lo et al. has opened the possibility of a non-invasive prenatal test (NIPT). Currently, it is employed in the analysis of aneuploidies and fetal sex determination. Massive parallel sequencing (MPS) detects the origin of each amplified sequence, and analyses over-representation of sequences or any decrease in the fetal chromosomes in maternal plasma. This technique has been validated and allows assessment of trisomies 13, 18 and 21, obtaining the result in about a week from 10-weeks of gestational age. By using NIPT, we expect a reduction in the number of invasive studies and the risk of fetal loss.

Objective: To communicate the experience obtained at Genetics Clinic of the Hospital Angeles Lomas, in the use of NIPT by MPS as a method of prenatal screening for aneuploidies and fetal sex determination.

Material and methods: A prospective, observational and descriptive study was carried out in order to develop a database of patients who underwent NIPT (Harmony test^®) from August 2013 to date. Maternal blood samples were analyzed at Ariosa Diagnostics Inc. at San Jose California, USA.

Results: Non-invasive prenatal test was applied to 42 patients, with average maternal age of 37.1 years. The percentage of gestational age was 13.3 weeks and of fetal fraction was 12.7%. Two cases of high risk of trisomy 18 and two cases with high risk for X monosomy were obtained. In only one case the test was used for fetal determination, because of a story of Wiskott-Aldrich (W-A) disease. In all cases of low risk, the result was confirmed at birth and fetal sex was consistent with reports of literature.

Conclusions: NIPT is currently the screening test with the highest detection rate (greater than 98%, with a false negative rate lesser than 0.5% and a sensitivity and specificity close to 100%), although it can vary from one chromosome to another. It is indicated for women with a result of high risk for trisomy 13, 18 and 21. This test has not been validated for low risk women or multiple pregnancies. In our series, the most frequent indication was advanced maternal age. The weight of the patients is important because it is a factor related to the percentage of fetal DNA. In cases with high risk for X monosomy in which the cytogenetic result was 46,XX, it is important to consider as much causes as possible, such as uniparental disomy (UPD), mosaicism and maternal contamination. Only in a case with W-A story the test was conducted specifically for fetal sex determination and confirmed by amniocentesis. In the cases of high-risk results, confirmation by an invasive method, before an obstetric decision, is indispensable. Further studies are still needed to continue the validation of this test by different molecular techniques and in other groups of patients.

Key words: non-invasive prenatal test (NIPT), cell-free-fetal DNA (cffDNA), prenatal screening.