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Evaluación de un microarreglo de anticuerpos en fase sólida para el estudio de quimiocinas secretadas por la membrana corioamniótica


Abreviatura:Ginecol Obstet Mex

Nardhy Yadira Gómez López, Guadalupe Estrada Gutiérrez, Jorge Beltrán Montoya, Felipe Vadillo Ortega

Objetivo: en las etapas fi nales del embarazo comienza una red de señalización que consiste en diferentes citocinas, quimiocinas y moléculas efectoras de naturaleza proteica. Debido a que esta red es compleja y difícil de estudiar en su contexto completo, el propósito de este trabajo es analizar la utilidad de un método de análisis proteómico que se base en anticuerpos en fase sólida, el cual permita distinguir la presencia simultánea de diferentes moléculas en muestras biológicas.

Tipo de estudio: biomédico experimental.

Material y método: se obtuvieron explantes de membranas corioamnióticas de mujeres con: embarazos a término, trabajo de parto espontáneo (n = 4) y cesárea (n = 4). Los explantes se incubaron durante 24 horas en medio de cultivo; se homogeneizaron y fi ltraron para obtener extractos, en los cuales se detectaron, de manera simultánea, diferentes quimiocinas al utilizar un microarreglo de anticuerpos antiquimiocinas inmovilizados en fase sólida, que comprendió: eotaxina, eotaxina 2, 1-309, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-2, MIG, MIP-1α, MIP-1β, MIP-1δ y RANTES.

Resultados: en los extractos de membranas corioamnióticas se encontraron las quimiocinas incluidas y la más abundante fue la IL-8. Cuando inicia el trabajo de parto hay tendencia a encontrar todas las quimiocinas en mayor concentración, excepto para RANTES, el cual desaparece cuando inicia el proceso.

Conclusiones: este enfoque metodológico permite señalar que las membranas corioamnióticas de mujeres con embarazo a término secretan diferentes quimiocinas, con un perfi l cualitativo que distingue el trabajo de parto. También, este enfoque permite la evaluación rápida de marcadores potenciales de este fenómeno biológico o patológico.

Palabras clave: membrana corioamniótica, microarreglo de anticuerpos en fase sólida, quimiocinas

Objective: At the end of pregnancy, a complex signaling network of cytokines, chemokines and proteic effector molecules is started. Due to such complexity, this network is very diffi cult to analyze. The aim of the present study was to evaluate the effectiveness of an antibodybased proteomic analysis method to distinguish the simultaneous presence of different molecules in biological samples.

Material and method: Amniochorion explants were obtained from women at term with spontaneous labor (n = 4) and subjected to cesarean section without labor (n = 4). Explants were cultured for 24 h and then homogenated in their own culture media to obtain cell free extracts. Chemokines were identifi ed in these extracts using a commercial array for chemokines that included: eotaxin, eotaxin 2, 1-309, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-2, MIG, MIP-1α, MIP-1β, MIP-1δ and RANTES.

Results: AII the included chemokines were found in amniochorion extracts, being IL- 8 the most abundant. However, once labor is present, all chemokines tend to appear in greater concentrations than those from non-in-labor tissues, except for RANTES, which disappeared when labor began.

Conclusion: This methodological approach shows that amniochorion from term pregnancies secrete chemokines with a characteristic qualitative profi le during labor. This approach would allow the fast evaluation of potential markers of this phenomenon in physiologic or pathologic conditions.

Keywords: amniochorion membrane, solid phase antibody microassay, chemokines

 



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